实验准备与标记：

1. 在6孔板背部，使用直尺辅助，以marker笔均匀划设平行直线，间距设定为0.5-1cm，每孔至少布局5条线，确保后续观察的全面性与精确性。（东极生物提示：线条务必保持笔直，以利精确分析。）

细胞接种与铺板： 2. 通过胰酶消化获取细胞悬液，并进行精确计数后，以每孔约5-10×10^5细胞的密度均匀接种。东极生物建议预先执行一次预实验，以优化实验条件与结果可靠性。

精确制造划痕： 3. 待细胞完全铺展后，沿预先标记的直线，使用直尺引导20μL枪头垂直下压形成划痕，确保各划痕宽度一致且与标记线精确交汇。操作时需保持枪头垂直，以防划痕不均。

清洗与培养基更换： 4. 于划痕后立即拍照记录初始状态（0h）。随后，温和地使用无菌PBS冲洗三次，细心去除脱落细胞，显露清晰的划痕间隙。此过程需避免强烈冲刷，推荐使用移液枪缓慢操作，以维护细胞单层完整性。

细胞培养观察： 5. 将处理后的细胞置于37°C，5% CO2条件下培养。按预定时间点（通常为0、6、12、24小时，东极生物提醒根据实验需求灵活设定）观察并记录划痕愈合情况。注意避免过长的观察周期，以免引入污染或细胞过度增殖导致的误读。

数据分析与结论： 6. 最后，对不同时间点的图像进行对比分析，评估细胞迁移能力。